二、將需滅菌的培養基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內，關閉鍋蓋，檢查排氣閥、安全閥狀態， 三、打開電源，檢查參數設置是否正確，然后按下“work”鍵，滅菌鍋開始工作；自動派冷氣，到105℃時，底部排氣閥門自動關閉，然后壓力開始上升；  

四、壓力升至 0.15MPa（121℃）時，滅菌鍋再次自動放氣，然后開始記時，一般培養基滅菌20min，蒸餾水滅菌30min；  

五、達到規定的滅菌時間后，關閉電源，打開放氣閥緩慢放氣；當壓力指針降至 0.00MPa時，放氣閥無蒸汽排除時，方可開啟鍋蓋。  

六、注意事項  1、汽未放盡前，不得開啟高壓鍋；  2、如果滅菌后的培養基在鍋內不及時拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開，切忌將培養基封閉在鍋內過夜。  3、壓力表指針在0.05MPa以上時，不能過快放汽，以防止壓力急速下降，液體滾沸，從培養容器中溢出。 4、操作過程，請注意安全，小心燙傷。

高溫滅菌鍋的使用方法

1．首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。  

2．放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。  

3．加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。  

4．用電爐或煤氣加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。待冷空氣*排盡后，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。本實驗用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分鐘滅菌。  

5．滅菌所需時間到后，切斷電源或關閉煤氣，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由于內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生污染。

6．將取出的滅菌培養基放入 37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用。 不過有幾點要注意的： 1.鍋內必須要有充足的水。 2.鍋的氣密性一定要很好。 3.使用完后一定要放到適合溫度才可以打開。